佐助在大蛇丸想要夺取他身体的关键时刻，勇敢地站了出来。在第333集，佐助与大蛇丸展开了激烈的战斗。在这场战斗中，佐助利用自己的写轮眼力量，试图将大蛇丸封印。由于大蛇丸的力量过于强大，佐助并没有成功。在第334集，大蛇丸试图将自己寄生在佐助的体内，但佐助凭借强大的意志力和查克拉，成功压制了大蛇丸。
在与大蛇丸的战斗中，宇智波鼬发现了大蛇丸的踪迹。在第358集，鼬佐兄弟大战中，鼬察觉到大蛇丸的气息，决定对佐助的战斗进行干预。在战斗的关键时刻，鼬使用了最后一招——须左能乎，配合十拳剑，将大蛇丸彻底封印。这是大蛇丸被佐助杀死的关键时刻。
在动画的第586集，宇智波佐助复活了历代火影。这一事件对于佐助来说具有重要意义，它不仅让他揭开了宇智波一族的真相，也为他复仇之路奠定了基础。在此之后，佐助开始寻找真正的敌人，即大蛇丸。
在剧情发展过程中，佐助为了证明自己的实力，决定先斩大蛇丸祭道。这是大蛇丸在剧情中第一次被杀死，但并未完全死去。在此次战斗中，佐助成功夺取了大蛇丸的所有忍术和白蛇的力量。
为了帮助佐助解开疑惑，大蛇丸使用秽土转生复活了历代火影。这一行为使得佐助得以了解宇智波一族的历史，也为他复仇之路铺平了道路。
随着宇智波鼬的登场，剧情进入了新的篇章。鼬的出现不仅为故事增添了更多的悬疑元素，也促使了佐助的成长。在这一阶段，我们见证了佐助为了追求力量而离开木叶村，踏上了寻找真相的旅程。
大蛇丸的洞府基地众多，光带着佐助一个月换一个隐藏据点，都令木叶村追查不到。而最令人毛骨悚然的是，蛇叔在战斗中的手段和策略，令人不寒而栗。
佐助与大蛇丸的生死对决贯穿了整个《火影忍者》动画。从第333集到第358集，再到第586集，佐助逐渐揭开真相，最终战胜了大蛇丸。这一过程不仅展现了佐助的成长，也揭示了《火影忍者》这部作品的精彩之处。
